摘要: 多樣品組織研磨儀對水稻研磨葉片研磨實驗主要目的是滿足分子標記輔助育種中基因型鑒定 、基因克隆 、測序的需要,本研究借用棉簽等具吸附功能的材料代替移液器,依次直接在2種DNA提取液中操作,建立了一種簡單 、快速 、環(huán)保的水稻葉片DNA提取方法.結(jié)果表明,提取溶液通過PCR擴增,滿足基因擴增對模板的要求;

同時,對其進行了靈敏度測試,稀釋107倍仍然能夠擴增出目標片段;最后通過PCR、克隆載體連接等分子生物學(xué)手段,驗證此方法也滿足測序的需要.本方法能夠在90s內(nèi)完成植物葉片DNA的提取,解決了目前植物基因組DNA提取方法需要離心機等昂貴特殊設(shè)備 、提取步驟繁鎖 、提取過程中刺激味大 、提取時間長等問題,有利于大規(guī)模開展分子標記輔助育種中材料基因型的鑒定,具有簡單 、快速 、廉價 、環(huán)保等優(yōu)點.

實驗?zāi)康模?/strong>擬測試全自動樣品快速研磨儀對水稻葉片研磨效果

1.測試對象：上海凈信多樣品組織研磨儀，型號為JXFSTPRP-24L

2.工作原理：樣品（水稻葉片）放入離心管中，放入研磨球，通過研磨儀的高速上下振蕩帶動研磨珠進行粉碎樣品。

3.實驗器材：上海凈信組織研磨儀主機，水稻葉片，不銹鋼研磨珠兩顆，提取試劑

實驗步驟：

一、首先根據(jù)研磨要求將組織研磨儀的研磨頻率及研磨時間進行設(shè)置

二、把水稻葉片剪成小段放入凈信離心管中，加入氧化鋯珠和相應(yīng)提取試劑

三、最后把離心管放入機器適配器中，啟動設(shè)備進行研磨，完成樣品粉碎

實驗效果：

研磨前后效果圖

注：多樣品組織研磨儀針對葉片的研磨時，盡可能加提取試劑，讓研磨過程中有液體的情況下使研磨效果會更加充分。